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子宫腺肌病患者诱生型一氧化氮合酶表达的研究 -凯发k8网页登录

发布时间:2011/11/15 14:23:22

【关键词】子宫腺肌病;子宫内膜;诱生型一氧化氮合酶;免疫组织化学

子宫腺肌病是妇科常见病,以在子宫肌壁内出现子宫内膜腺体和间质为其病变征,此病多发生于30~50岁经产妇,临床上往往以子宫增大、痛经和月经过多为其主要症状。近年来对该病的发生机制提出一些新的看法,关于血管生成、免疫等方面的异常在子宫腺肌病的发生发展中起重要作用。子宫内膜侵入子宫肌层后,血管生成活性的增强,为异位内膜的种植生成提供了有利条件。no可诱导血管内皮细胞的分裂增生,调节血管生成及血流量,由此推测可在子宫腺肌的发生发展中发挥作用。所以本研究用免疫组化的方法,测定子宫腺肌病患者在位内膜与异位内膜诱导型一氧化氯合酶(inos)的含量,旨在探讨其在子宫腺肌病的发生发展过程中所起的作用和意义,为临床治疗提供理论依据。

1、资料与方法

1.1 标本 来源材料均取本院2006年9月—2008年3月手术切除并有完整临床资料的子宫标本,腺肌病组:子宫腺肌病38例,患者年龄35~49岁,平均年龄38.9岁;子宫内膜组织学分期:增生期20例,分泌期18例。肌瘤组:无症状子宫肌瘤31例,38~51岁,平均年龄43.2岁;子宫内膜组织学分期:增生期17例,分泌期14例两组患者术前3个月内均未服用任何激素类药物。所有病例均行子宫全切或次全切除术,并经病理诊断证实。即用型sabc免疫组织化学染色试剂盒(产品编号:sa1022)为武汉博士德生物工程有限公司产品。

1.2 方法 石蜡切片常规二甲苯脱蜡,梯度酒精水化,pbs液洗5min,3%h2o25min,pbs洗5min;10%山羊血清室温10min;一抗(1∶50),冰箱4℃过夜,pbs洗5min;二抗(1∶150)37℃温箱30min,pbs洗5min;sabc30min,pbs洗5min;dab显色5min,自来水冲洗;苏木素复染,脱水透明,封片。

1.3 结果 判定结果判断标准以细胞浆出现黄色颗粒为阳性,表达强度用组织学评分表示。组织学评分为σpi,其中i代表细胞浆染色强度,分为4级:0级无黄色颗粒,1级为淡黄色颗粒,2级为黄色颗粒,3级为棕色颗粒;p代表同一染色强度细胞所占计数细胞百分数,1、2、3、4、5分别代表染色细胞占计数细胞总数的0%~15%、16%~50%、51%~85%、86%~95%、96%~100%。每张切片随机测定5个高倍镜视野(200倍)的染色强度,取5个视野的组织学评分均值作为最终得分。

1.4 统计学处理 实验结果用x±s表示,采用方差分析和两两比较t检验,p<0.05为有显著性差异。

2、结果

inos在正常或异位内膜腺上皮都有阳性表达,两组的血管平滑肌也有阳性表达,而在间质细胞及子宫平滑肌细胞均未见阳性表达。

2.1 腺肌病组在位子宫内膜与肌瘤组子宫内膜inos组织学评分比较 腺肌病组增殖期或分泌期子宫内膜与肌瘤组比较,腺上皮inos组织学评分无明显变化,两组比较,差异无显著性(p>0.05)。同时,两组子宫内膜腺上皮的增殖期和分泌期inos组织学评分比较,差异无显著性(p>0.05),即无周期性变化,两组患者正常内膜、异位内膜腺上皮细胞inos组织学评分比较注:*与肌瘤组正常内膜比较,p>0.05,▲与在位内膜比较,p<0.05,△与同组增殖期比较p>0.05

2.2 腺肌病组在位内膜与异位内膜inos组织学评分比较 腺肌病组增殖期或分泌期异位内膜腺上皮细胞inos组织学评分均较在位内膜显著增加,两者比较,差异有显著性(p<0.05)。异位内膜、在位内膜及正常内膜各组内增殖期和分泌期比较均无明显差别,即无周期性变化。两者比较差异无显著性(p>0.05)。

2.3 腺肌病组与肌瘤组血管平滑肌inos组织学评分比较 腺肌病组血管平滑肌细胞inos组织学评分(8.6±1.3)较肌瘤组血管平滑肌细胞inos组织学评分(3.5±1.4)显著增加,两者比较,差异有显著性(p<0.05)。

3、讨论

内源性no是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,nos)以l 精氨酸为底物,在还原型辅酶ⅱ(nadph)存在下生成,催化该反应的nos有两种同工酶,即结构型nos(constitutivenos,cnos)和诱生型nos(induciblenos,inos),前者合成的no含量很小,主要参与人体的正常生理活动,主要存在与内皮细胞,神经原细胞,肾上腺皮质细胞和血小板等。机体内inos催化产生大量no主要参与机体的病理生理过程,本研究结果显示,腺肌病患者在位子宫内膜与子宫肌瘤患者子宫内膜inos的表达强度无明显差异,均无周期性变化。腺肌病患者异位内膜inos的表达强度显著高于其在位内膜。另外schindl等研究发现在子宫腺肌病中,在位内膜微血管密度与正常内膜间无差异,而异位内膜则高于在位内膜和正常内膜,且在月经周期中无改变,与本研究结果一致,说明子宫内膜在侵入子宫肌层后,血管生成活性增强。

另外本研究结果显示,在腺肌病组,血管平滑肌inos表达强度高于肌瘤组,表明no还通过血管扩张作用,增加血流量,为异位内膜种植提供条件。子宫内膜异位种植后,由于生理特性的改变,可通过自分泌细胞因子诱导inos产生增强而调节no的合成。杨丹等的实验结果提示,雌激素与er结合后,可能通过增加血管平滑肌细胞的inos的活性和蛋白的表达,促进其生成和释放no增加。另外,no可诱导内皮细胞的分裂、增生,调节血管形成为异位内膜的形成创造条件。没有no,生长中的肿瘤大小会因血供缺乏而受到限制,也从另一方面提示了血管生成在腺肌病中的重要作用。总之,在腺肌病的发病过程中,异位内膜inos的高表达,致使no合成量增加,血管扩张,并利于血管形成,增加血流量,为子宫内膜的异位种植和生长提供了有利条件。

【参考文献】

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